ÖZET VE AÇIKLAMA TEST
Sıtma, yılda 200 milyondan fazla insanı enfekte eden ve 1 milyondan fazla insanı öldüren sivrisinek kaynaklı, hemolitik, ateşli bir hastalıktır.Dört Plasmodium türü neden olur: P. falciparum, P. vivax, P. ovale ve P. malariae.Bu plazmodilerin tümü insan eritrositlerini enfekte eder ve yok ederek titreme, ateş, anemi ve splenomegali üretir.P. falciparum, diğer plazmodiyal türlerden daha şiddetli hastalığa neden olur ve çoğu sıtmadan ölümden sorumludur.P. falciparum ve P. vivax en yaygın patojenlerdir, ancak tür dağılımında önemli coğrafi farklılıklar vardır.
Geleneksel olarak sıtma, organizmaların Giemsa ile boyanmış kalın periferik kan yaymalarında gösterilmesiyle teşhis edilir ve farklı plazmodyum türleri, enfekte eritrositlerdeki görünümleriyle ayırt edilir.Teknik, doğru ve güvenilir tanı koyma yeteneğine sahiptir, ancak yalnızca, dünyanın uzak ve fakir bölgeleri için büyük engeller oluşturan, tanımlanmış protokoller kullanılarak yetenekli mikroskopistler tarafından gerçekleştirildiğinde.
Sıtma Pf/Pv Ag Hızlı Testi bu engelleri çözmek için geliştirilmiştir.P. falciparum Histidin Zengin Protein-II'ye (pHRP-II) ve P. vivax Laktat Dehidrojenaz'a (Pv-LDH) özgü antikorları kullanarak P. falciparum ve P. vivax ile enfeksiyonu aynı anda saptar ve ayırt eder.Test, eğitimsiz veya asgari düzeyde vasıflı personel tarafından laboratuvar ekipmanı olmaksızın gerçekleştirilebilir.
PRENSİP
Sıtma Pf/Pv Ag Hızlı Testi, yanal akış kromatografik bir immünolojik testtir.Şerit test bileşenleri şunlardan oluşur: 1) kolloid altınla konjuge fare anti-Pv-LDH antikoru (Pv-LDH-altın konjugatları) ve kolloid altınla konjuge fare anti-pHRP-II antikoru (pHRP-II-altın konjugatları) içeren bordo renkli konjugat pedi, 2) iki test bandı (Pv ve Pf bantları) ve bir kontrol bandı (C bandı) içeren bir nitroselüloz membran şeridi.Pv bandı, Pv enfeksiyonunun tespiti için başka bir fare anti-Pv-LDH'ye özgü antikor ile önceden kaplanmıştır, Pf bandı, Pf enfeksiyonunun tespiti için poliklonal anti-pHRP-II antikorları ile önceden kaplanmıştır ve C bandı, keçi anti-fare IgG ile kaplanmıştır.
Test sırasında, test kasetinin numune kuyucuğuna (S) yeterli miktarda kan numunesi dağıtılır, tampon kuyusuna (B) bir lizis tamponu eklenir.Tampon, kırmızı kan hücrelerini parçalayan ve kasette tutulan şerit boyunca kılcal hareketle hareket eden çeşitli antijenleri serbest bırakan bir deterjan içerir.Numunede mevcutsa Pv-LDH, Pv-LDH-altın konjugatlarına bağlanacaktır.İmmünokompleks daha sonra önceden kaplanmış anti-Pv-LDH antikoru tarafından zar üzerinde yakalanarak bordo renkli bir Pv bandı oluşturarak Pv pozitif test sonucunu gösterir.Alternatif olarak, numunede mevcutsa pHRP-II, pHRP-II-altın konjugatlarına bağlanacaktır.İmmünokompleks daha sonra önceden kaplanmış anti-pHRP-II antikorları tarafından zar üzerinde yakalanır ve bordo renkli bir Pf bandı oluşturarak Pf pozitif test sonucunu gösterir.Herhangi bir test bandının olmaması, negatif bir sonuç olduğunu gösterir.Test, herhangi bir test bandındaki renk gelişimine bakılmaksızın keçi anti-fare IgG / fare IgG (anti-Pv-LDH ve anti-pHRPII)-altın konjugatlarının immün kompleksinin bordo renkli bir bandını göstermesi gereken bir dahili kontrol (C bandı) içerir.Aksi halde test sonucu geçersiz olur ve numunenin başka bir cihazla tekrar test edilmesi gerekir.
